因業(yè)務(wù)調(diào)整，部分個(gè)人測(cè)試暫不接受委托，望見(jiàn)諒。

檢測(cè)項(xiàng)目

腸道病毒EV71檢測(cè)體系包含三大核心模塊：病原體核酸檢測(cè)、特異性抗體檢測(cè)及病毒生物學(xué)鑒定。核酸檢測(cè)通過(guò)RT-PCR技術(shù)靶向VP1基因保守區(qū)實(shí)現(xiàn)病毒RNA定性/定量分析；血清學(xué)檢測(cè)采用ELISA法測(cè)定IgM/IgG抗體效價(jià)；病毒分離培養(yǎng)需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行人橫紋肌肉瘤（RD）細(xì)胞系接種觀察細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）。

補(bǔ)充項(xiàng)目包括：

1. 基因測(cè)序分型：針對(duì)VP1全長(zhǎng)基因進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析

2. 中和抗體試驗(yàn)：評(píng)估疫苗免疫后的保護(hù)性抗體水平

3. 多重病原聯(lián)檢：與柯薩奇病毒A16等常見(jiàn)腸道病毒鑒別診斷

檢測(cè)范圍

本檢測(cè)方案適用于以下臨床及公共衛(wèi)生場(chǎng)景：

1. 手足口病疑似病例的病原學(xué)確診

2. 無(wú)菌性腦膜炎/腦炎患者的病因溯源

3. 重癥病例治療過(guò)程中的病毒載量監(jiān)測(cè)

4. 聚集性疫情暴發(fā)的流行病學(xué)調(diào)查

5. 疫苗臨床試驗(yàn)免疫效果評(píng)價(jià)

6. 院感控制中的環(huán)境樣本篩查

典型樣本類型包括：

- 臨床樣本：咽拭子（發(fā)病3日內(nèi)）、肛拭子（發(fā)病5-7日）、腦脊液（神經(jīng)癥狀期）

- 生物樣本：急性期與恢復(fù)期雙份血清（間隔2-4周）

- 環(huán)境樣本：物體表面拭子、污水濃縮液

檢測(cè)方法

標(biāo)準(zhǔn)操作流程嚴(yán)格遵循WS 588-2018《手足口病診斷》及WHO腸道病毒實(shí)驗(yàn)室指南：

1. 核酸提?。翰捎么胖榉ㄈ詣?dòng)核酸提取儀處理樣本

2. RT-qPCR：使用經(jīng)CFDA認(rèn)證的試劑盒（探針?lè)ǎ?，循環(huán)閾值（Ct值）≤38判定陽(yáng)性

3. IgM捕獲ELISA：包被抗人μ鏈單克隆抗體捕獲血清IgM

4. 微量中和試驗(yàn)：固定病毒量（100TCID50）與系列稀釋血清反應(yīng)

5. 二代測(cè)序：針對(duì)疑難樣本進(jìn)行宏基因組學(xué)分析

質(zhì)量控制要點(diǎn)包括：

- 每批次實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性對(duì)照（無(wú)模板對(duì)照）與陽(yáng)性對(duì)照（體外轉(zhuǎn)錄RNA）

- PCR擴(kuò)增效率要求90-110%，R2值≥0.98

- ELISA試驗(yàn)OD值需在校準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)（0.1-2.5）

- 細(xì)胞培養(yǎng)傳代不超過(guò)第10代

檢測(cè)儀器

標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配置以下設(shè)備系統(tǒng)：

1. 核酸擴(kuò)增平臺(tái)：ABI 7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（配套Fast7500模塊）

2. 血清學(xué)分析系統(tǒng)：BioTek Synergy H1多功能酶標(biāo)儀

3. 生物安全設(shè)備：BSC-II級(jí)生物安全柜（符合EN12469標(biāo)準(zhǔn)）

4. 細(xì)胞培養(yǎng)體系：CO?恒溫培養(yǎng)箱（溫度波動(dòng)±0.5℃）

5. 輔助設(shè)備群組：包括低溫高速離心機(jī)（≥12,000×g）、核酸濃度測(cè)定儀（波長(zhǎng)260/280nm）、超低溫冰箱（-80℃±3℃）

儀器校準(zhǔn)維護(hù)要求：

- PCR儀每年進(jìn)行溫度梯度驗(yàn)證（孔間溫差≤0.5℃）

- 酶標(biāo)儀每月開(kāi)展光路校準(zhǔn)（濾光片精度±2nm）

- 生物安全柜每季度完成氣流速度測(cè)試（進(jìn)風(fēng)風(fēng)速≥0.5m/s）

- 離心機(jī)每半年實(shí)施轉(zhuǎn)子動(dòng)平衡校正

檢測(cè)流程

1、咨詢：提品資料(說(shuō)明書(shū)、規(guī)格書(shū)等)

2、確認(rèn)檢測(cè)用途及項(xiàng)目要求

3、填寫檢測(cè)申請(qǐng)表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測(cè))

5、收到樣品，安排費(fèi)用后進(jìn)行樣品檢測(cè)

6、檢測(cè)出相關(guān)數(shù)據(jù)，編寫報(bào)告草件，確認(rèn)信息是否無(wú)誤

7、確認(rèn)完畢后出具報(bào)告正式件

8、寄送報(bào)告原件